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Genom-Editierung mit dem CRISPR-Cas9-System|Paris Roidos

Genom-Editierung mit dem CRISPR-Cas9-System

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Overview

Die Genomtechnik steht kurz vor dem Beginn ihres goldenen Zeitalters. Neue und aufregende Werkzeuge tauchen auf und erweitern das Arsenal. Nach TALENs und Zing-Fingern kommt nun ein neues und vielversprechendes Werkzeug hinzu. Die neueste Erg nzung ist das CRISPR-System. Ein System, das zuerst bei Streptococcus thermophilus entdeckt wurde und dessen nat rliche Rolle die sequenzspezifische adaptive Immunit t gegen fremde DNA in Bakterien ist. Im vorliegenden Bericht wird das CRISPR Cas9-System vom Typ II verwendet, um das in Lymphozyten exprimierte HPRT1-Gen auszuschalten, um ein Konzept zu testen. Als Selektionsmedium wird HAT-Medium in Kombination mit Thioguanin verwendet, was ein schnelles und einfaches Auslese-Screeningverfahren erm glicht. Um zu berpr fen, ob ein erfolgreiches Editing-Ereignis in den S ugetierzellen stattgefunden hat, wird ein DNA-Spaltungskit in Kombination mit einem enzymatischen Assay verwendet.

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Details

  • ISBN-13: 9786208348281
  • ISBN-10: 6208348285
  • Publisher: Verlag Unser Wissen
  • Publish Date: December 2024
  • Dimensions: 9 x 6 x 0.13 inches
  • Shipping Weight: 0.21 pounds
  • Page Count: 56

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